ОПЫТ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯТ-КЛЕТОЧНОЙ КЛОНАЛЬНОСТИ


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель исследования. При дифференциальной диагностике реактивной Т-клеточной пролиферации
и опухолевой важно подтвердить клональность Т-клеток. Классические методы гистологии
и иммунофенотипирования не позволяют оценить Т-клеточную клональность. Мы приводим
наш опыт определения Т-клеточной клональности по реаранжировкам у-цепи Т-клеточного
рецептора (TCRy).
Материалы и методы. Определение Т-клеточной клональности по реаранжировкам у-цепи
Т-клеточного рецептора проводилось при помощи полимеразной цепной реакции (ПЦР) с последующим
анализом конформационного полиморфизма одноцепочечных продуктов (SSCP).
Обследовали 20 здоровых (доноров), 28 больных с Т-клеточными опухолями и 26 с различными
не Т-клеточными опухолями и реактивными процессами.
Результаты. Выявляемость Т-клеточной клональности у больных с доказанными Т-клеточными
лимфомами составила 82% (23/28), при этом у всех здоровых (доноров) продемонстрирован
поликлональный характер реаранжировок TCRy. Чувствительность метода составила
2,5, 7 и 10% для костного мозга, селезенки и периферической крови соответственно.
Заключение. Метод ПЦР-SSCP для TCRy является хорошим дополнением к классическим цитологическим,
гистологическим и иммунофенотипическим методам в диагностике Т-клеточных
лимфатических опухолей.

Об авторах

Ю В Сидорова

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

Е А Никитин

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

М Пекло

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

Т Н Власик

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

Р С Самойлова

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

С К Кравченко

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

А Л Меликян

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

Ю Е Виноградова

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

А В Пивник

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

А Б Судариков

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

ГНЦ РАМН; Российский кардиологический научно-производственный комплекс Минздрава РФ, Москва

Список литературы

  1. Воробьев А. И., Кременецкая А. М., Харазшивили Д. Опухоли лимфатической системы. Гематол. и трансфузиол 2000; 3: 1-14.
  2. WHO. Classification of neoplasms of the hematopoietic amlymphoid tissues / Harris N. L., Jaffe E. S., Diebold J. et al Airlie House, Virginia 1997.
  3. Никитин E. А., Левина E. А., Судариков А. Б. Роль молекулярных методов в диагностике и мониторинге лимфопролиферативных заболеваний. Гематол. и трансфузиол 2001; 3: 19-26.
  4. Signoretti S., Murphy M., Cangi M. G. et al. Detection of clonal T-cell receptor у gene rearrangements in paraffm-embeddectissue by polymerase chain reaction and nonradioactive singlestrand conformational polymorphism analysis. Am. J. Pathol 1999; 154 (1): 67-75.
  5. Rezuke W. N., Abernathy E. C., Tsongalis G. J. Molecular diagnosis of B- and T-cell lymphomas: fundamental principles and clinical applications. Clin. Chem. 1997; 43 (10): 1814- 1823.
  6. Arber D. A. Molecular diagnostic approach to non-Hodgkin'slymphoma. J. Mol. Diagn. 2000; 2 (4): 178-190.
  7. Arber D. A., Braziel R. M., Bagg A., Bijwaard К. Е. Evaluation of T cell receptor testing in limphoid neoplasms. Results of a Multicenter study of 29 extracted DNA and paraffin-embedded samples. Ibid. 2001; 3 (4): 133-140.
  8. Cabras A. D., Kremer M., Schulz S. et al. Quality assessment in diagnostic molecular pathology: experience from a German- Austrian-Swiss multicenter trial. Virchows Arch. 2000; 437 (1): 46-51.
  9. Greiner Т. С. Advances in molecular hematopathology: T-cell receptor у and bcl-2 genes. Am. J. Pathol. 1999; 154 (1): 7- 10.
  10. Mainl M. K., Casorati G., Dellabona P. et al. T-cell clonality in immune responses. Immunol. Today 1999; 20 (6): 262-266.
  11. Callan M. F., Steven N., Krausa P. et al. Large clonal expansions of CD8+ T cells in acute infectious mononucleosis. Nat. Med. 1996; 2 (8): 906-911.
  12. Southern E. Detection of specific sequences among DNA fragments separated by gel electrophoresis. J. Mol. Biol. 1975; 98: 503-517.
  13. Langerok A. W., Wolvers-Tettero I. L. M., van Dongen J. J. M. Detection of T cell receptor beta (TCRB) gene rearrangement pattern in T-cell malignancies by Southern blot analysis. Leukemia 1999; 13: 965-974.
  14. Moreau E. J., Langerak A. W., van Gastel-Mol E. J. et al. Easy detection of all TCRG gene rearrangements by Southern blotanalysis: recommendations for optimal results. Ibid. 1620- 1626.
  15. Greiner T. C., Raffeld M., Lutz С. et al. Analysis of T-cell receptor-gamma gene rearrangements by denaturing gradient gelelectrophoresis of GC-clamped polymerase chain reaction products', correlation with tumor-specific sequences. Am. J. Pathol. 1995; 146: 46-55.
  16. Orita M., Iwahana H., Kanazawa H. et al. Detection of polymorphism by human DNA by gel electrophoresis as singlestrand conformation polymorphism. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1989; 86 (8): 209-214.
  17. Lynas C., Howe D. Simple, reliable detection of T cell clones by PCR-L1S-SSCP analysis of TCRy rearrangement. Mol. Cell. Probes 1998; 12: 41-48.
  18. Lefranc M.-P., Lefranc G. The T cell receptor facts book. London: Academic Press; 2001.
  19. Breit T. M., Wolvers-Tettero L. M., Hahlen K. et. al. Extensive junctional diversity of gamma delta T-cell receptors expressed by T-cell acute lymphoblastic leukemias: implications for the detection of minimal residual disease. Leukemia 1992; 6 (2): 169-170.
  20. Kneba M., Bolz I., Linke B. et al. Characterization of clonespecific rearrangement T-cell receptor gamma-chain genes in lymphomas and leukemias by the polymerase chain reaction and DNA sequencing. Blood 1994; 84 (2): 574-581.
  21. Theodorou I., Delfau Larue M. H., Bigorgne C. et al. Cutaneous T-cell infiltrates: analysis of T-cell receptor gamma gene rearrangement by polymerase chain reaction and denaturing gradient gel electrophoresis. Blood 1995; 86: 305-310.
  22. Dippel E., Assaf C., Hummel M. et al. Clonal T-cell receptor gamma-chain gene rearrangement by PCR-based GeneScan analysis in advanced cutaneous T-cell lymphoma: a critical evaluation. J. Pathol. 1999; 188: 146.
  23. Klemke С. D., Dippel E., Dembinski A. et al. Clonal T cell receptor gamma-chain gene rearrangement by PCR-based GeneScan analysis in the skin and blood of patients with parapsoriasis and early-stage mycosis fungoides. Ibid. 2002; 197 (3): 348-354.
  24. Theriault C., Galoin S., Valmary S. et al. PCR analysis of immunoglobulin Heavy chain (IgH) and TcR-gamma chain generearrangements in the diagnosis of lymphoproliferative disorders: Results of study of 525 cases. Mod. Pathol. 2000; 13 (12): 1269-1279.
  25. Miwa H., Nosaka Т., Kita K. et al. Immunogenotypes of lymphoid malignancies; the rearrangement of T cell receptor beta chain gene can occur before the gamma chain gene rearrangement. Jpn J. Cancer Res. 1988; 79 (4):484-490.
  26. Asou N., Matsuoka M., Hattori T. et al. T cell gamma gene rearrangements in hematologic neoplasms. Blood 1987; 69 (3): 968-970.
  27. Szczepanski Т., Langerak A. W., Wolvers-Tetero I. L. M. et al. Immunoglobulin and T cell receptor gene rearrangement pattern in acute lymphoblastic leukemia are less mature in adults than in children: implications for selection of PCR targets for detection of minimal residual disease. Leukemia 1998; 12: 1081-1088.
  28. Fodinger M., Winkler K., Mannhalter C., Chott A. Combined polymerase chain reaction approach for clonality detection in lymphoid neoplasms. Diagn. Mol. Pathol. 1999; 8 (2): 80-91.
  29. Wickham C. L., Lynas C., Ellard S. Detection of clonal T cell populations by high resolution PCR using fluorescently labelled nucleotides, evaluation using conventional LIS-SSCP. J. Clin. Mol. Pathol. 2000; 53: 150-154.
  30. Dippel E., Klemke D., Hummel M. et al. T-cell clonality of undetermined significance. Blood 2001; 98 (1): 247-248.
  31. Posnett D. N., Sinha R., Kabak S., Russo С. Clonal populations of T cells in normal elderly humans: the T cell equivalent to benign monoclonal gammapathy". J. Exp. Med. 1994; 179 (2): 609-618.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© ООО "Консилиум Медикум", 2003

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0 International License.
 

Адрес издателя

  • 127055, г. Москва, Алабяна ул., 13, корп.1

Адрес редакции

  • 127055, г. Москва, Алабяна ул., 13, корп.1

По вопросам публикаций

  • +7 (926) 905-41-26
  • editor@ter-arkhiv.ru

По вопросам рекламы

  • +7 (495) 098-03-59

 

  


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах