(Стрепт)авидин взаимодействует с гликоконъюгатами

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Флуоресцентно меченный и конъюгированный (стрепт)авидин широко используется для визуализации биотинилированных молекул в иммунологических анализах и гистохимии. В представленной работе показано, что кроме биотина, эти белки связывают ряд гликанов, в том числе фрагменты гликопротеиновых и гликолипидных цепей млекопитающих, в частности, антигены системы крови АВО, олиголактозамины, 6-О-сульфатированные олигосахариды. Это взаимодействие дозозависимо ингибируется гликанами в полимерной (но не в мономерной) конъюгированной форме на уровне микромолярной концентрации, т.е. требует поливалентности. С учётом кластерной организации гликанов клетки (гликопротеинов и гликолипидов), при исследовании объектов, содержащих углеводы, это свойство является потенциальным источником ошибки, которую можно предотвратить, избегая большого избытка (стрепт)авидина в аналитической системе.

Полный текст

Доступ закрыт

Об авторах

Н. В. Шилова

Институт биоорганической химии имени академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН; Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова

Автор, ответственный за переписку.
Email: pumatnv@gmail.com
Россия, 117997, Москва; 117997, Москва

С. М. Полякова

Институт биоорганической химии имени академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН

Email: pumatnv@gmail.com
Россия, 117997, Москва

А. Ю. Нокель

Институт биоорганической химии имени академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН; Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова

Email: pumatnv@gmail.com
Россия, 117997, Москва; 117997, Москва

А. Д. Липатников

Институт биоорганической химии имени академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН

Email: pumatnv@gmail.com
Россия, 117997, Москва

Е. А. Гордеева

Институт биоорганической химии имени академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН

Email: pumatnv@gmail.com
Россия, 117997, Москва

М. В. Лаврентьева

МИРЭА – Российский технологический университет

Email: pumatnv@gmail.com
Россия, 119571, Москва

Н. В. Бовин

Институт биоорганической химии имени академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН

Email: pumatnv@gmail.com
Россия, 117997, Москва

Список литературы

  1. Green, M. N. (1990) Avidin and streptavidin, Methods Enzymol., 184, 51-67, https://doi.org/10.1016/0076-6879(90)84259-J.
  2. Bing, T., Chang, T., Qi, C., Zhang, N., Liu, X., and Shangguan, D. (2012) Specific interactions between adenosine and streptavidin/avidin, Bioorg. Med. Chem. Lett., 22, 7052-7055, https://doi.org/10.1016/j.bmcl.2012.09.088.
  3. Caparon, M. H., De Ciechi, P. A., Devine, C. S., Olins, P. O., and Lee, S. C. (1996) Analysis of novel streptavidin-binding peptides, identified using a phage display library, shows that amino acids external to a perfectly conserved consensus sequence and to the presented peptides contribute to binding, Mol. Divers., 1, 241-246, https://doi.org/10.1007/BF01715528.
  4. Houen, G., and Hansen, K. (1997) Interference of sugars with the binding of biotin to streptavidin and avidin, J. Immunol. Methods, 210, 115-123, https://doi.org/10.1016/S0022-1759(97)00166-X.
  5. Smith, J. A., Xu, G., Feng, R., Janetka, J. W., and Moeller, K. D. (2016) C‐glycosides, array‐based addressable libraries, and the versatility of constant current electrochemistry, Electroanalysis, 28, 2808-2817, https://doi.org/10.1002/elan.201600200.
  6. Ennen, F., Boye, S., Lederer, A., Cernescu, M., Komber, H., Brutschy, B., Voit, B., and Appelhans, D. (2014) Biohybrid structures consisting of biotinylated glycodendrimers and proteins: influence of the biotin ligand’s number and chemical nature on the biotin–avidin conjugation, Polym. Chem., 5, 1323-1339, https://doi.org/10.1039/C3PY01152F.
  7. Beber, A., Alqabandi, M., Prévost, C., Viars, F., Lévy, D., Bassereau, P., Bertin, A., and Mangenot, S. (2019) Septin‐based readout of PI(4,5)P2 incorporation into membranes of giant unilamellar vesicles, Cytoskeleton, 76, 92-103, https://doi.org/10.1002/cm.21480.
  8. Obukhova, P., Tsygankova, S., Chinarev, A., Shilova, N., Nokel, A., Kosma, P., and Bovin, N. (2020) Are there specific antibodies against Neu5Gc epitopes in the blood of healthy individuals? Glycobiology, 30, 395-406, https://doi.org/10.1093/glycob/cwz107.
  9. Ahmad, N., Gabius, H.-J., Kaltner, H., André, S., Kuwabara, I., Liu, F.-T., Oscarson, S., Norberg, T., and Brewer, C. F. (2002) Thermodynamic binding studies of cell surface carbohydrate epitopes to galectins-1, -3, and -7: evidence for differential binding specificities, Canad. J. Chem., 80, 1096-1104, https://doi.org/10.1139/v02-162.
  10. Shilova, N., Bovin, N., Maltseva, D., Polyakova, S., Sablina, M., Niwa, H., Zakharova, G., Raygorodskaya, M., Bufeeva, L., Belyi, Y., Hushpulian, D., and Tonevitsky, A. (2022) Specificity of viscumin revised. As probed with a printed glycan array, Biochimie, 202, 94-102, https://doi.org/10.1016/j.biochi.2022.08.009.
  11. Tuzikov, A., Chinarev, A., Shilova, N., Gordeeva, E., Galanina, O., Ovchinnikova, T., Schaefer, M., and Bovin, N. (2021) 40 years of glyco-polyacrylamide in glycobiology, Glycoconj. J., 38, 89-100, https://doi.org/10.1007/s10719-020-09965-5.
  12. Obukhova, P., Rieben, R., and Bovin, N. (2007) Normal human serum contains high levels of anti-Galα1-4GlcNAc antibodies, Xenotransplantation, 14, 627-635, https://doi.org/10.1111/j.1399-3089.2007.00436.x.
  13. Duhamel, R. C., and Whitehead, J. S. (1990) Prevention of nonspecific binding of avidin, 201-207, https://doi.org/ 10.1016/0076-6879(90)84275-L.
  14. Nyhlin, N., El-Salhy, M., Sandström, O., and Suhr, O. (1997) Evaluation of immunohistochemical staining of human duodenal endocrine cells after microwave antigen retrieval, Histochem. J., 29, 177-181, https://doi.org/ 10.1023/a:1026441623791.
  15. Kim, S. H., Jung, K. C., Shin, Y. K., Lee, K. M., Park, Y. S., Choi, Y. L., Oh, K. I., Kim, M. K., Chung, D. H., Son, H. G., and Park, S. H. (2002) The enhanced reactivity of endogenous biotin-like molecules by antigen retrieval procedures and signal amplification with tyramine, Histochem. J., 34, 97-103, https://doi.org/10.1023/a:1020954611464.
  16. Shone, C., Ferreira, J., Boyer, A., Cirino, N., Egan, C., Evans, E., Kools, J., and Sharma, S. (2006) The 5th international conference on basic and therapeutic aspects of Botulinum and tetanus neurotoxins. Workshop review: assays and detection, Neurotox. Res., 9, 205-216, https://doi.org/10.1007/BF03033940.
  17. Dundas, C. M., Demonte, D., and Park, S. (2013) Streptavidin–biotin technology: improvements and innovations in chemical and biological applications, Appl. Microbiol. Biotechnol., 97, 9343-9353, https://doi.org/10.1007/s00253-013-5232-z.
  18. Jain, A., and Cheng, K. (2017) The principles and applications of avidin-based nanoparticles in drug delivery and diagnosis, J. Controll. Rel., 245, 27-40, https://doi.org/10.1016/j.jconrel.2016.11.016.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Приложение 1
Скачать (16KB)
Метаданные
3. Приложение 2
Скачать (36KB)
Метаданные
4. Рис. 1. Гликаны, показавшие наилучшее взаимодействие со стрептавидином, меченным Alexa 555 (в концентрации 1 мкг/мл). Гликановый эррей состоял из 174 гликанов, иммобилизованных в виде полиакриламидных конъюгатов, Glyc-РАА [11]. Максимально возможное значение флуоресценции (ОЕФ) в этой аналитической системе составляет около 65 000; сигналы от пятен, не содержащих лигандов, то есть фон, не превышают 100 ОЕФ. Все моносахариды, за исключением рамнозы, являются D-пиранозами. Тривиальные названия олигосахаридов приведены в круглых скобках. См. подробнее в Приложении 1

Скачать (173KB)
Метаданные
5. Рис. 2. Взаимодействие стрептавидина, меченного ПХ (в концентрации 0,1 мкг/мл), с конъюгатами Glyc-РАА: а – концентрационная зависимость взаимодействия с гликоконъюгатами, иммобилизованными в лунках 96-луночного планшета; б – дозозависимое ингибирование взаимодействия меченого стрептавидина с иммобилизованным GlcNAcα-РАА с помощью GlcNAcα-РАА и GlcNAcβ-РАА, а также неконъюгированными GlcNAcα-sp и GlcNAcβ-sp (sp – спейсер). ОП – оптическая плотность

Скачать (213KB)
Метаданные
6. Рис. 3. Снижение концентрации стрептавидина при визуализации связывания RCA120 с его лигандами не повлияло ни на общую интенсивность сигнала, ни на профиль взаимодействия. Коэффициент корреляции Пирсона равен 0,92. См. подробнее в Приложении 2

Скачать (79KB)
Метаданные

© Российская академия наук, 2024