SERUM LEVELS OF MYELOID-RELATED PROTEIN MRP 8/14 (CALPROTECTIN) IN ARMENIAN PATIENTS WITH FAMILIAL MEDITERRANEAN FEVER (FMF)

Full Text

Периодическая болезнь (ПБ), или cемейная cредиземноморская лихорадка (Familial Mediterranean Fever — FMF; MIM 249 100), — наследственное аутовоспалительное системное заболевание с аутосомно- рецессивным типом наследования и определенной этнической предрасположенностью [1, 2], характеризующееся приступами полисерозитов и лихорадки. ПБ в основном распространена среди народов, проживающих на Средиземноморском побережье (арабы, турки, греки), и малочисленных народов, имеющих древнейшее происхождение (армяне, евреи). До настоящего времени имеется недостаточно информации относительно уровня MRP 8/14 (каль- — 45 — З. Т. Джндоян Концентрация MRp 8/14 в сыворотке крови больных ПБ до и после лечения Кх, больных РА и здоровых лиц Обследованная группа MRP 8/14 р} р 2 рз р4 Больные ПБ до лечения КХ (n = 13) 16,97 ± 2,17 — < 0,001 < 0,001 > 0,05 Резистентные к КХ больные ПБ (n = 23) 15,18 ± 2,58 > 0,05 < 0,01 < 0,001 — Больные ПБ, не отвечающие на 1,5 мг КХ (n = 19) 7,88 ± 2,35 < 0,05 > 0,05 < 0,05 < 0,05 Больные ПБ, отвечающие на различные дозы КХ: без амилоидоза (n = 11) 7,57 ± 3,08 < 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 с нефропатией в протеинурической стадии (n = 14) 8,87 ± 2,56 < 0,05 > 0,05 < 0,05 > 0,05 Больные РА (контрольная группа; n = 11) 4,30 ± 1,10 < 0,001 — < 0,05 < 0,01 Здоровые лица (контрольная группа; n = 11) 1,24 ± 0,13 < 0,001 < 0,05 — < 0,001 Примечание. р} — сравнение всех групп с группой больных ПБ до лечения КХ; р2 — сравнение всех групп с контрольной группой больных РА; р3 — сравнение всех групп с контрольной группой здоровых лиц; р4 — сравнение всех групп с группой резистентных к КХ больных ПБ. протектина) в крови больных ПБ. Кроме того, нет данных о концентрации кальпротектина в сыворотке крови больных ПБ армянской популяции. Связанный с миелоидом белок MRP 8/14 (myeloid-related protein) — маркер фагоцитарной активности [3], называемый также кальпротектином или антигеном муковисцидоза; это гетеродимер двух кальций-связывающих белков (S100A8 и S100A9 соответственно MRP 8 и MRP14, или кальгранулин А и В), вовлеченный в зависимые от кальция процессы и процессы дифференциации клеток и взаимодействия цитоскелета и мембраны [4]. MRP 8 и MRP14 в основном се-кретируются в клетках миелоидного происхождения, в частности в моноцитах и нейтрофилах [5]. Активация фагоцитов приводит к формированию из MRP 8 и MRP14 комплекса MRP 8/14, который перемещается к цитоскелету и плазматической мембране, где он секре-тируется [6—8]. Это начало трансэндотелиальной миграции и взаимодействия секретирующих MRP ней-трофилов и моноцитов с эндотелием [9—12]. Итак, MRP 8/14 отражает фагоцитарную активность [13]. Цель нашего исследования состояла в определении содержания MRP 8/14 в сыворотке крови больных ПБ армянской популяции до лечения и после лечения колхицином — КХ (больных ПБ, отвечающих на различные дозы КХ; больных ПБ, резистентных к КХ, т. е. не отвечающих на 2 мг КХ; больных, не отвечающих на 1,5 мг КХ), а также определение эффективности противовоспалительной терапии. Материалы и методы В исследование включили 80 больных ПБ (40 женщин и 40 мужчин) в возрасте от 14 до 58 лет, которых разделили на следующие группы: 1) не получившие лечения (n = 13); 2) резистентные к КХ (больные, не отвечающие на 2 мг КХ) с продолжающимися приступами (n = 23); больные, не отвечающие на 1,5 мг КХ (n = 19); 4) больные, отвечающие на различные дозы КХ: без амилоидоза (n = 11) и больные с нефропатией в протеи-нурической стадии (n = 14). В контрольную группу включены больные ревматоидным артритом — РА (n = 11) и здоровые лица (n = 11). Для диагностики ПБ использованы данные анамнеза, клинического и лабораторно-инструментального исследований (в том числе определение мутаций гена MEFV). Обследовали больных ПБ со смешанной, абдоминальной или торакальной формами, с суставным синдромом во внеприступном периоде. Были исключены больные с хронической почечной недостаточностью, сахарным диабетом, травмами, инфекциями во избежание изменений результатов исследования. Концентрацию MRP 8/14 в сыворотке крови определяли им-муноферментным методом (ELISA) с использованием набора "Bühlmann" (Швейцария) в лаборатории, оборудованной в соответствии с европейскими стандартами. Пробирки с кровью оставляли на 45 мин при комнатной температуре (18—28oC) в темном месте, затем центрифугировали со скоростью 1800 g в течение 15 мин при комнатной температуре (18—28oC) и немедленно отделяли сыворотку, которую хранили при температуре —20oC. В норме концентрация MRP 8/14 в сыворотке крови < 0,4 — 3,9 мг/мл. Для статистической обработки данных использовали программу SPSS. Статистически значимыми считали результаты при p < 0,05. Результаты Предварительно получены следующие данные. Уровни MRP 8/14 в сыворотке крови здоровых лиц контрольной группы были в пределах нормы. У больных ПБ, не получавших лечения, и больных ПБ после лечения КХ, а также у больных РА концентрация MRP 8/14 в сыворотке крови была выше нормы, причем уровень MRP 8/14 в крови у больных ПБ был выше, чем у больных РА. Концентрация MRP 8/14 в сыворотке крови больных ПБ до лечения КХ была выше, чем у больных, получивших лечение. У получивших лечение КХ больных ПБ с нефропатией в протеинурической стадии концентрация MRP 8/14 в сыворотке крови оказалась выше, чем у больных без амилоидоза (см. таблицу). О бсужде ние MRP 8 и MRP 14 относятся к семейству S100 связанных с кальцием белков, которые секретируются клетками миелоидного происхождения. Фагоциты, выделяющие эти белки, описаны при различных воспалительных процессах, в том числе при РА, заболеваниях кишечника и легких и при отторжении трансплантата [14, 15]. Выделение на поверхность — быстрая ответная реакция на увеличение внутриклеточного уровня Са2+. В процессе трансэндотелиальной миграции фагоцитов комплекс MRP 8/14 секрети-руется во внеклеточное пространство (плазму), давая возможность определить его [11]. Таким образом, секреция этого белка при определенных состояниях может оказаться ценным тестом для дифференциальной диагностики воспалительных реакций [16]. В связи с этим уровень MRP 8/14 также важен в сфере трансплантации органов, так как и отторже — 46 — Концентрация кальпротектина в крови больных периодической болезнью армянской популяции ние, и инфекции приводят к воспалительным изменениям [16]. K. Burkhardt и соавт. [17] показали высокую чувствительность и специфичность MRP 8/14 в ранней диагностике отторжения. Секреция MRP 8 и MRP 14 играет важную роль в развитии аутоиммунного воспаления при аутоиммунных заболеваниях [18]. Выработка MRP 8 и MRP 14 усиливается при различных аутоиммунных заболеваниях. MRP 8 и MRP 14 имеют большое значение в развитии воспаления и стимуляции провоспалительных цитокинов [19—22]. В наших исследованиях концентрация MRP 8/14 в сыворотке крови больных ПБ, не получавших лечения, оказалась в 4 раза выше нормы, что свидетельствует о высокой активности заболевания у этих больных. Уровень MRP 8/14 в сыворотке крови этих же больных выше, чем у больных, получивших лечение, т. е. MRP 8/14 отражает эффективность противовоспалительной терапии. Однако высокие уровни MRP 8/14 у резистентных к КХ больных ПБ и больных, не отвечающих на 1,5 мг КХ, отражают неэффективность терапии КХ у данных больных и свидетельствуют о том, что у них сохраняется высокая субклиническая воспалительная активность. Уровни MRP 8/14 выше нормы у больных ПБ, чувствительных к кохицинотерапии, свидетельствуют о том, что у этих больных также сохраняется суб-клиническая воспалительная активность, причем у больных с нефропатией в протеинурической стадии она выше, чем у больных без амилоидоза. М. Madland и соавт. [23—25] выявили корреляцию между кальпротектином (MRP 8/14) и С-РБ у больных РА и подтвердили, что кальпротектин — надежный маркер активности заболевания и воспаления суставов. Таким образом, MRP 8/14 может рассматриваться в качестве очень чувствительного маркера воспаления. В наших исследованиях концентрация MRP 8/14 в сыворотке крови больных ПБ как до лечения, так и после лечения КХ оказалась выше, чем у больных РА, что позволяет определять MRP 8/14 с целью дифференциальной диагностики ПБ. По мнению H. Witkowski и соавт. [26], связанный с миелоидом белок MRP 8/14 может рассматриваться в качестве наиболее чувствительного маркера субклинической воспалительной активности ПБ. Определение MRP 8/14 является ценным тестом для оценки активности воспалительного процесса при ПБ и эффективности противовоспалительной терапии [27], что подтверждено нашими исследованиями с участием больных ПБ армянской популяции. Эти исследования продолжаются. Определение MRP 8/14 может быть полезным для разработки нового подхода к лечению резистентных к КХ больных ПБ и для диагностики отторжения после трансплантации пораженных амилоидозом почек при ПБ.

About the authors

Z T Dzhndoyan

M. Geraci Erevan State Medical University

Email: jndoyanzinaida@rambler.ru
Chair of Therapy N 2 Armenia

References

Supplementary files