Разработка и апробация тест-системы для выявления РНК-вируса, вызывающего тяжелый острый респираторный синдром


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель исследования. Разработка тест-системы на основе пояимеразной цепной реакции (ПЦР) для выявления РНК коронавируса, вызывающего тяжелый острый респираторный синдром (ТОРС), определение ее аналитических и диагностических характеристик. Материалы и методы. В работе использовали 68 вирусных и бактериальных культур 240 образцов клинического материала от людей без симптомов ТОРС, а также 22 образца РНК, полученных от пациентов, поступавших в период эпидемии ТОРС в лечебные учреждения Пекина с диагнозом ТОРС.
Результаты. Специфичность тест-системы, определенная с использованием штаммов коронавирусов животных и гетерологичных штаммов вирусов и бактерий, вызывающих острые респираторные и кишечные инфекции, составила 100%. Чувствительность тест-системы во всех рекомендованных видах клинического материала составила 2,2- Iff геномных эквивалентов рекомбинантной РНК вируса ТОРС в 1 мл исследуемого материала, или 10 ТЦД5(/мл вируса ТОРС в вируссодержащей жидкости. Испытания тест-системы на базе Пекинского института микробиологии и эпидемиологии показали, что диагностическая чувствительность тест-системы "АмплиСенс SARS" на клиническом материале от пациентов с предполагаемым диагнозом ТОРС составила 95%. При этом эффективность выявления в образцах фекалий была выше, чем в образцах мокроты (90 и 40% соответственно).
Заключение. В ЦНИИ эпидемиологии Минздрава РФ разработана тест-система "АмплиСенс SARS" для выявления РНК коронавируса, вызывающего ТОРС, методом обратной транскрипции и ПЦР в смывах из носо- и ротоглотки, мазках из носо- и ротоглотки, фекалиях и плазме крови. Тест-система включает реагенты для выделения РНК из клинического материала, получения кДНК на матрице РНК, проведения амплификации участка генома вируса ТОРС и электрофоретического анализа продуктов ПЦР и содержит рекомбинантные положительный и внутренний контрольные образцы, позволяющие контролировать эффективность проведения анализа. Испытания показали хорошие аналитические и диагностические характеристики тест-системы.

Об авторах

Г А Шипулин

ГУ ЦНИИ эпидемиологии Минздрава РФ; Научно-производственная лаборатория Федерального научно-методического центра СПИД

Москва; ГУ ЦНИИ эпидемиологии Минздрава РФ; Научно-производственная лаборатория Федерального научно-методического центра СПИД

С Б Яцышина

ГУ ЦНИИ эпидемиологии Минздрава РФ; Научно-производственная лаборатория Федерального научно-методического центра СПИД

Москва; ГУ ЦНИИ эпидемиологии Минздрава РФ; Научно-производственная лаборатория Федерального научно-методического центра СПИД

В П Чуланов

ГУ ЦНИИ эпидемиологии Минздрава РФ; Научно-производственная лаборатория Федерального научно-методического центра СПИД

Москва; ГУ ЦНИИ эпидемиологии Минздрава РФ; Научно-производственная лаборатория Федерального научно-методического центра СПИД

М Ю Маркелов

ГУ ЦНИИ эпидемиологии Минздрава РФ; Научно-производственная лаборатория Федерального научно-методического центра СПИД

Москва; ГУ ЦНИИ эпидемиологии Минздрава РФ; Научно-производственная лаборатория Федерального научно-методического центра СПИД

О Ю Шипулина

ГУ ЦНИИ эпидемиологии Минздрава РФ; Научно-производственная лаборатория Федерального научно-методического центра СПИД

Москва; ГУ ЦНИИ эпидемиологии Минздрава РФ; Научно-производственная лаборатория Федерального научно-методического центра СПИД

А Т Подколзин

ГУ ЦНИИ эпидемиологии Минздрава РФ; Научно-производственная лаборатория Федерального научно-методического центра СПИД

Москва; ГУ ЦНИИ эпидемиологии Минздрава РФ; Научно-производственная лаборатория Федерального научно-методического центра СПИД

Т С Астахова

ГУ ЦНИИ эпидемиологии Минздрава РФ; Научно-производственная лаборатория Федерального научно-методического центра СПИД

Москва; ГУ ЦНИИ эпидемиологии Минздрава РФ; Научно-производственная лаборатория Федерального научно-методического центра СПИД

A Шишова

ГУ ЦНИИ эпидемиологии Минздрава РФ; Научно-производственная лаборатория Федерального научно-методического центра СПИД

Москва; ГУ ЦНИИ эпидемиологии Минздрава РФ; Научно-производственная лаборатория Федерального научно-методического центра СПИД

- Wuchun Cao

Институт микробиологии и эпидемиологии Военно-медицинской академии Министерства обороны Китая

Пекин; Институт микробиологии и эпидемиологии Военно-медицинской академии Министерства обороны Китая

- Liu Wei

Институт микробиологии и эпидемиологии Военно-медицинской академии Министерства обороны Китая

Пекин; Институт микробиологии и эпидемиологии Военно-медицинской академии Министерства обороны Китая

- Fan Baochang

Институт микробиологии и эпидемиологии Военно-медицинской академии Министерства обороны Китая

Пекин; Институт микробиологии и эпидемиологии Военно-медицинской академии Министерства обороны Китая

Список литературы

  1. Lee N., Hui D. S., Wu A. et al. A major outbreak of severe acute respiratory syndrome in Hong Kong. N. Engl. J. Med. 2003; 348: 1984-1994.
  2. Poutanen S. M., Low D. E., Henry B. et al. Identification of severe acute respiratory syndrome in Canada. N. Engl. J. Med. 2003; 348 (20): 1995-2005.
  3. Hsu L. Y., Lee С. С., Green J. A. et al. Severe acute respiratory syndrome in Singapore: clinical features of index patient and initial contacts. Emerg. Infect. Dis. 2003; 9 (6): 713-717.
  4. Murra M. A., Jones S. J. M., Astell С. R. et al. The genome sequence of the SARS-associated coronavirus. Science 2003; 300: 1399-1404.
  5. Uo L. K., Godeke G. J., Raamsman M. J. B. et al. Retargeting of coronavirus by substitution of the spike glycoprotein ectodomain: Crossing the host cell species barrier. J. Virol. 2000; 74 (3): 1393-1406.
  6. Virus taxonomy. Classification and nomenclature of viruses / van Regenmortel M. H. V. et al. New York: Academic Press; 2000.
  7. Rota P. A., Oberste M. S., Monroe S. S. et al. Characterization of a novel coronavirus associated with severe acute respiratory syndrome. Science 2003; 300: 1394-1399.
  8. Poland A. M., Vennema H., Foley J. E. et al. Two related strains of feline infectious peritonitis virus isolated from immunocompromised cats infected with a feline enteric coronavirus. J. Clin. Microbiol. 1996; 34 (2): 3180-3184.
  9. Peiris J. S. M., Chu С. М., Cheng V. С. С. Clinical progression and viral load in a community outbreak of coronavirus-associated SARS pneumonia: a prospective study. Lancet 2003; 36): 1767-1772.
  10. Worobey M., Holmes E. C. Evolutionary aspects of recombination in RNA viruses. J. Gen. Virol. 1999; 80: 2535-2543.
  11. Banner L. R., Lai M. M. Random nature of coronavirus RNA recombination in the absence of selection pressure. Virology 1991; 185 (1): 441-445.
  12. Boom R., Sol С. J. A., Salimans M. M. M. et al. Rapid and simple method for purification of nucleic acides. J. Clin. Microbiol. 1990; 28: 495-503.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML

© ООО "Консилиум Медикум", 2004

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0 International License.
 

Адрес издателя

  • 127055, г. Москва, Алабяна ул., 13, корп.1

Адрес редакции

  • 127055, г. Москва, Алабяна ул., 13, корп.1

По вопросам публикаций

  • +7 (926) 905-41-26
  • editor@ter-arkhiv.ru

По вопросам рекламы

  • +7 (495) 098-03-59

 

 


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах