Aim. To determine plasma extracellular low-molecular-weight DNA (elmwDNA) as an indicator of apoptosis in patients with chronic obstructive pulmonary disease (COPD) in remission versus healthy donors, patients with chronic non-obstructive bronchitis (CNOB), and their first-degree relatives (FDRs). Subjects and methods. The investigation recruited 110 participants, including 17 healthy donors, 31 patients with COPD, and 20 patients with CNOB in remission, 19 healthy FDRs of patients with COPD, and 23 healthy FDRs of those with SNOB. The plasma levels of elmwDNA were determined in the study participants. Nucleic acids were isolated by phenol/chloroform extraction, precipitated with ethanol, and treated with RNase; elmwDNA was analyzed by electrophoresis. Results. In patients with COPD, the mean level of elmwDNA was 7.8±2.0 ng/ml, which was 3.9 and 3.0 times statistically significantly lower than that in healthy donors and patients with SNOB, respectively; while the level of elmwDNA in the latter did not differ statistically significantly from that in healthy donors. In both the blood relatives of patients with COPD and FDRs of those with SNOB, the mean level of elmwDNA was not significantly different from that in healthy donors. The content of elmwDNA tended to increase in COPD patients aged 60—80 years as compared to those aged 45—59 years; that in both age groups was, however, significantly lower than in healthy donors of the same age. Conclusion. The level of elmwDNA in plasma and, accordingly, apoptosis in the lung are reduced in patients with COPD in remission, whereas that is unchanged in those with SNOB. In patients with COPD, blood elmwDNA release is unrelated to heredity and varies little with age. The determination of elmwDNA is recommended for use in patients with COPD to assess apoptosis.
Резюме Цель исследования. Определение внеклеточной низкомолекулярной ДНК (внмДНК) в плазме крови как показателя апоптоза у больных хронической обструктивной болезнью легких (ХОБЛ) в состоянии ремиссии по сравнению со здоровыми донорами, больными хроническим необструктивным бронхитом (ХНБ), и их родственниками первой линии родства (РПЛР). Материалы и методы. В исследование набрали 110 участников: 17 здоровых доноров, 31 больной ХОБЛ и 20 больных ХНБ в состоянии ремиссии, 19 здоровых РПЛР больных ХОБЛ, 23 здоровых родственника первой линии больных ХНБ. У участников исследования определяли в плазме крови содержание мДНК. Нуклеиновые кислоты выделяли путем экстракции фенолом/хлороформом и осаждали этанолом, обрабатывали РНКазой, внмДНК анализировали электрофоретически. Результаты. У больных ХОБЛ среднее содержание внмДНК составляло 7,8±2,0 нг/мл, что статистически значимо в 3,9 и 3,0 раза меньше, чем соответственно у здоровых доноров и больных ХНБ; причем содержание внмДНК у больных ХНБ не отличалось статистически значимо от такового у здоровых доноров. У кровных родственников больных ХОБЛ, как и у РПЛР больных ХНБ, среднее содержание внмДНК статистически значимо не отличалось от такового у здоровых доноров. У больных ХОБЛ 60—80 лет по сравнению с больными ХОБЛ 45—59 лет наблюдалась тенденция к увеличению содержания внмДНК, однако уровень внмДНК в обеих возрастных группах оказался статистически значимо ниже, чем у здоровых доноров того же возраста. Заключение. У больных ХОБЛ в состоянии ремиссии содержание мДНК в плазме крови и соответственно процессы апоптоза в легких снижены, тогда как у больных ХНБ содержание внмДНК не меняется. Выделение внмДНК в кровь у больных ХОБЛ не связано с наследственностью и мало меняется с возрастом. Определение внмДНК рекомендуется использовать у больных ХОБЛ для оценки апоптоза.