канд. мед. наук, докторант отд-ния высокодозной химиотерапии ГНЦ; ФГБУ Гематологический научный центр Минздравсоцразвития РФ
канд. биол. наук, вед. науч. сотр. биохимической группы отд-ния химиотерапии лейкозов ГНЦ; ФГБУ Гематологический научный центр Минздравсоцразвития РФ
канд. биол. наук, науч. сотр. биохимической группы отд-ния химиотерапии лейкозов ГНЦ; ФГБУ Гематологический научный центр Минздравсоцразвития РФ
д-р мед. наук, вед. науч. сотр. отд-ния высокодозной химиотерапии лейкозов и трансплантации костного мозга ГНЦ; ФГБУ Гематологический научный центр Минздравсоцразвития РФ
член-кор. РАМН, науч. рук. отд-ния высокодозной химиотерапии лейкозов и трансплантации костного мозга ГНЦ; ФГБУ Гематологический научный центр Минздравсоцразвития РФ
Hematological Research Center, Moscow
Hematological Research Center, Moscow
Hematological Research Center, Moscow
Hematological Research Center, Moscow
Hematological Research Center, Moscow
Aim. To study levels of hepsidine (Hp), hypoxia-inducible factor-1alpha (HIF-1α), erythropoietin (EP) and ferritin in patients with acute leukemia (AL), effects of protein fractions of homogenate of blastic cells (BC) on regulatory proteins studied. Material and methods. Depending on leukocyte count in the onset of AL, 70 patients with first ever diagnosed AL were divided into two groups: group 1 - 17 patients with leukocyte count > 30109/l, group 2 - 53 patients with leukocyte count < 30109/l. Serum and leukocyte parameters were studied before treatment, during the treatment with cytostatic drugs, in the course of myelotoxic agranulocytosis (MTA), after normalization of hemograms. EP was detected with enzyme immunoassay, serum and leukocyte ferritin - with radioimmunoassay; HIF-1α, Hp - sandwich enzyme immunoassay using monospecific antisera and monoclonal antibodies against relevant antigens. Leukocytes were isolated in ficol and verografin solutions density gradient. Chromatographic division of the protein fractions in 3 patients with leukocytosis in AL onset and leukocytes of 3 donors was made by the method of preparative isoelectrofocusing of BC and leukocytes on LKB colon (Sweden). Effects of these fractions were studied on 11 plasma samples from hematological patients and 4 plasma samples from patients with normal hemopoiesis. Results. Leukocytosis patients with initial AL have serum ferritin, Hp and HIF-1α levels about 2-5 times lower than patients without leukocytosis. Cytostatic treatment raises an HIF-1α level in BC about 15-fold (85.8±24.5 pg/ml), in the study group - 3-fold (15.2±3.3 pg/ml). The highest EP levels were seen in MTA. It is detected that protein fractions isolated from leukocytes of patients with leukocytosis in the disease onset raise HIF-1α content irrespective of HIF-1α presence in the fraction. Patients free of hematological diseases have no changes of the above proteins. Conclusion. Great difficulties exist in ferritin and Hp levels between AL patients with leukocytosis in the onset of the disease and without of leukocytosis. The study of leukocytes suggests that tumor cells of such patients contain compounds which can regulate production of HIF-1α, Hp and ferritin.
Цель исследования. Определение уровней гепсидина (Гп), фактора, индуцируемого гипоксией (hypoxia-inducible factor-1α - HIF-1α), эритропоэтина (ЭПО) и ферритина у больных острыми лейкозами (ОЛ), а также изучение влияния белковых фракций гомогенатов бластных клеток (БК) на исследуемые регуляторные белки. Материалы и методы. Обследовали 70 пациентов с впервые диагностированными ОЛ. В зависимости от уровня лейкоцитов в дебюте заболевания больных разделили на 2 группы: 1-я - 17 пациентов с лейкоцитозом более 30109/л, 2-я - 53 пациента с лейкоцитозом < 30109/л. Все параметры изучали в сыворотке и лейкоцитах в динамике: до начала терапии; во время лечения цитостатическими препаратами; во время миелотоксического агранулоцитоза (МТА); после нормализации гемограммы. Определяли эритропоэтин методом иммуноферментного анализа, ферритин сыворотки и ферритин лейкоцитов иммунорадиометрическим методом; HIF-1α, Гп - иммуноферментным методом в варианте "сандвич", с использованием моноспецифических антисывороток и моноклональных антител против соответствующих антигенов. Лейкоциты выделяли в градиенте плотности растворов фикола и верографина. Хроматографическое разделение белковых фракций у 3 больных с лейкоцитозом в дебюте заболевания и лейкоцитов 3 доноров проведено методом препаративного изоэлектрофокусирования гомогенатов БК и лейкоцитов на колонке LKB (Швеция). Влияние этих фракций изучали на 11 образцах плазмы гематологических больных и 4 образцах плазмы пациентов без патологии кроветворения. Результаты. У больных с лейкоцитозом в дебюте заболевания уровни ферритина сыворотки, Гп и HIF-1α были приблизительно в 2-5 раз ниже, чем у больных основной группы без лейкоцитоза. Во время цитостатического воздействия уровень HIF-1α в БК повышается почти в 15 раз (85,8 ± 24,5 пг/мл), а у больных основной группы - лишь в 3 раза (15,2 ± 3,3 пг/мл). Наибольшие уровни ЭПО обнаружены во время МТА. Выявлено, что под влиянием белковых фракций, выделенных из лейкоцитов больных с лейкоцитозом в дебюте заболевания, увеличивается содержание HIF-1α, причем независимо от того, содержится ли в этой фракции белок HIF-1α. У больных без гематологических заболеваний изменения параметров исследуемых белков не обнаружены. Заключение. При лейкоцитозе в дебюте заболевания у больных ОЛ наблюдаются большие отличия уровня ферритина и Гп от таковых основной группы. Результаты исследований лейкоцитов позволяют предположить, что в опухолевых клетках этих больных содержатся соединения, которые могут влиять на выработку HIF-1α, Гп и ферритина.